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两种不同的四氧化锇固定液的制备方法个体经营陈先生万芳

发布时间:2020-02-14 11:32:34 阅读: 来源:叉车厂家

两种不同的四氧化锇固定液的制备方法-个体经营(陈先生)

静电子显徽健超薄切片技术是透射电镜(TEM)样本制备的基本方法,而样本固定是最基础的一个环节。是整个样本制备过程中非常关键的一步。四氧化锇是TEM样本侧备中的后固定剂,主要对细胞的脂类和蛋白质有良好的固定作用。 常规的样本侧备过程中通常使用磷酸缓冲液配制的1%-2%浓度固定样本,固定液和样本比例的为lml:lmm,因扫描电镜样本较大,固定浪的用量更多。在常规电镜样本制备过程中四氧化锇消耗量大,且价格昂贵。 电镜样品固定是指用化学固定剂或冷冻、干燥及高温等物理方法迅速杀死细胞的过程,目的是尽可能使细胞中的各种细胞器以及大分子保持原有牛活状态,不发生位移,使得在脱水、包埋、切片、染色以及电镜观察期间,组织结构变化最小。 选用生理盐水配制低浓度四氧化锇固定肾脏组织,通过TEM观察细胭的超徽结构,比较五种不同浓度的固定效果,井与常规1%四氧化锇固定液进行比较皆在探索出一种既节的OsO4,又能获得良好的固定效果的浓度。 四氧化锇固定液的配置: (1)实脸组:医用0.9%生理盐水,市售四氧化锇定液,先用生理盐水将OsO4配成2%的原液。然后用时再将原液分别配成0.5%、0.6%、0.75%、0.9%和1%的固定液即可使用。 (2)对照组:2%磷酸盐缓冲液,市售四氧化锇定液。先用蒸馏水将0s04配2%的原液,然后用时与2%磷酸盐盐缓冲液1:1稀释即可使用。 电镜观察肾组织结构,用生理盐水配置的五种浓度四氧化锇固定的肾组织均具有良好的反差和高质量的超微结构特征,与常规磷酸缓冲液配制的1%四氧化锇固定的肾组织细胞亦无明显差异。 用生理盐水配制的OsO4增加了Na、Cl,这样使固定液的渗透速度加快。同时使脂质抽提减少,故使细胞和磷脂保存较常规方法好。由于生理盐水有透析作用,前固定后用生理盐水能将残留的戊二醛冲洗赶干净,防止了戊二醛和四氧化锇反应而影响固定效果。牛理盐水特别是医用生理盐水不易产生沉淀及使细菌生长而磷酸缓冲液易产生沉锭及易使细菌生长。 随看荆临床医院肾活检工作作的厂泛开展,各电镜室的肾脏活检工作人人增加。肾活检标本往往比较小,因此采用0.5%四氧化锇固定完全可以获得良好的效果,可大大节约Os04的消耗。这样做,是一种非常好的节约成本的方式,同时促进整个医疗行业的发展。 阅读本文的人,同时喜欢阅读: 1%浓度的四氧化锇水溶液的配制方法 化学药品四氧化锇的用途

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